RT-LAMP Colormetriese Meestermengsel HCB5204A
Hierdie produk bevat reaksiebuffer, RT-ensiememengsel (Bst DNA-polimerase en hittebestande tru-transkriptase), gevriesdroogde Beskermers en chromogeniese kleurstofkomponente.Om te gebruik, gebruik net Buffer, die reaksie-ensiem en onderlaag word gemeng en by die sjabloon gevoeg;byvoeging van gevriesdroogde beskermer kan reguit wees.Dit is aan 'n lyofiliseerder gekoppel en gevriesdroog, en slegs die primers en sjablone is bygevoeg wanneer dit gebruik is.Hierdie stel verskaf 'n vinnige, duidelike visuele opsporing van versterking, welke negatiewe reaksie in rooi aangedui word en positiewe reaksie word aangedui deur 'n verandering na geel.
Komponent
| Komponent | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| Lus-bemiddelde versterkingsbuffer (met kleurstof) | 0,96 ml | 4,80 mL×2 | 9,60 ml × 10 |
| RT-ensiememengsel | 270 μL | 2,70 ml | 2,70 ml × 10 |
| Gevriesdroogde beskermer | 0,96 mL×2 | 9,60 mL×2 | 9,60 mL×20 |
Aansoeke
Vir DNA of RNA isotermiese amplifikasie.
Bergingsvoorwaardes
Vervoer met droë ys, gestoor by -25~ -15℃.Vermy gereelde vries-ontdooi, die produk is geldig vir 12 maande.
Protokol
1.Ontdooi die reaksiebuffer wat gebruik gaan word by kamertemperatuur.Vortex kortliks of keer buise verskeie kere om om deeglik te meng, sentrifugeer dan om die vloeistof na die onderkant van die buis te versamel.
2.Voorbereiding van reaksiesisteem.Hierdie reagens kan in twee reaksiestelsels, vloeibare reaksiemengsel en gevriesdroogde stelselmengsel, voorberei word.
1) Berei vloeibare reaksiemengsel voor
| Komponent | Volume |
| Lus-bemiddelde versterkingsbuffer (met kleurstof) | 10 μL |
| RT-ensiememengsel | 2,8 μL |
| 10 × Primer Mengsela | 5 μL |
| Sjablone DNA/RNA b | × μL |
| Nuklease-vrye water | Tot 50 μL |
2) Vriesdroogstelselmengsel
① Berei gevriesdroogde mengsel voor
| Komponent | Volume |
| Lus-bemiddelde versterkingsbuffer (met kleurstof) | 10 μL |
| Gevriesdroogde beskermer | 20 μL |
| RT-ensiememengsel | 2,8 μL |
| Nuklease-vrye water | Tot 50 μL |
② Vriesdroog: Die voorbereide mengsel is gevriesdroog in 'n 50μL-stelsel
③ Berei reaksiemengsel voor
| Komponent | Volume |
| Gevriesdroogde mengsel | 1 stuk |
| 10 × Primer Mengsela | 5 μL |
| Sjablone DNA/RNA b | × μL |
| Nuklease-vrye water | Tot 50 μL |
Notas:
1) a.10×Primer Mix: 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Loop F/B;
2) b.DEPC (wateroplosbaar) word aanbeveel vir nukleïensuurtempl.
1.Inkubeer by 65°C vir 30-45 minute, wat gepas verleng kan word volgens kleurverandering Reaksietyd.
2.Volgens die blote oog was geel positief en rooi negatief.
Notas
1.Sout kan in die bodem van die bufferbuis verskyn, vlugtig draai of buise verskeie kere omkeer om deeglik te meng by kamertemperatuur.
2.Die reaksietemperatuur kan geoptimaliseer word tussen 62 ℃ en 68 ℃ volgens die toestand van primers.
3.Die verpakte reagense moet nie vir 'n lang tyd aan lug blootgestel word nie.
4.Die rooi en geel verkleuringsreaksie hang af van die pH-verandering van die reaksiestelsel, moet asseblief nie die Tris-nukleïensuuropbergingsoplossing gebruik nie, aanbeveel om ddH te gebruik2O gestoorde nukleïensuur;
5.Die eksperiment moet gestandaardiseer word, insluitend die voorbereiding van die reaksiestelsel, vriesdroging, en monsterverwerking en monsterbyvoegingsproses;
6.Om besoedeling te vermy, word dit aanbeveel om die reaksiestelsel in 'n ultra-skoon bankie voor te berei, in ander Voeg sjablone by die dampkap van die kamer om vals positiewe inmenging te vermy.
