Robustart Taq DNA Polimerase

Robustart Taq DNA Polimerase is 'n warm begin DNA polimerase.Hierdie produk kan nie net die nie-spesifieke reaksie wat veroorsaak word deur die nie-spesifieke uitgloeiing van primers of primer-aggregasie in die proses van PKR-stelsel voorbereiding en amplifikasie beter inhibeer nie.Daarom het dit uitstekende spesifisiteit en is dit meer effektief vir die amplifikasie van lae konsentrasie sjablone, en dit is geskik vir multiplekse PCR amplifikasie reaksie.Boonop het hierdie produk baie goeie toepaslikheid, en stabiele amplifikasieresultate kan in verskillende tipes PKR-reaksies verkry word.

Komponente

1.5 U/μL Robustart Taq DNA-polimerase

2.10 × PCR Buffer II (Mg²+ vry) (opsioneel)

3.25 mM MgCl₂(opsioneel)

* 10 × PCR Buffer II (Mg²+ vry) bevat nie dNTP en Mg²+ nie, voeg asseblief dNTP's en MgCl by₂wanneer die reaksiestelsel voorberei word.

Aanbevole toepassings

1.Vinnige versterking.

2.Veelvuldige versterking.

3.Direkte versterking van bloed, deppers en ander monsters.

4.Opsporing van respiratoriese siektes.

Berging Toestand

-20°C vir langtermynberging, moet goed gemeng word voor gebruik, vermy gereelde vries-ontdooiing.

*As neerslag ná verkoeling voorkom, is dit normaal;dit word aanbeveel om te ewewig tot kamertemperatuur voor vermenging en gebruik.

Eenheid Definisie

Een aktiewe eenheid (U) word gedefinieer as die hoeveelheid ensiem wat 10 nmol deoksiribonukleotied in suur-onoplosbare materiaal inkorporeer by 74°C vir 30 minute deur gebruik te maak van geaktiveerde salmsperm-DNS as templaat/onderlaag.

Kwaliteitsbeheer

1.SDS-PAGE elektroforetiese suiwerheid groter as 98%.

2.Amplifikasie sensitiwiteit, bondel-tot-batch beheer, stabiliteit.

3.Geen eksogene nuklease aktiwiteit, geen eksogene endonuklease of eksonuklease kontaminasie

Instruksies

Reaksie-opstelling

Notas:

1) a.Die buffer bevat nie dNTP en Mg²+ nie, voeg asseblief dNTP's en MgCl by₂wanneer die reaksiestelsel voorberei word.

2) b.As dit vir qPCR/qRT-PCR gebruik word, moet fluoresserende probes by die reaksiestelsel gevoeg word.Gewoonlik sal 'n finale onderlaagkonsentrasie van 0,2 μM goeie resultate gee;as die reaksieprestasie swak is, kan die onderlaagkonsentrasie in die reeks van 0.2-1 μM aangepas word.Die sondekonsentrasie word gewoonlik geoptimaliseer in die reeks van 0.1-0.3 μM.Konsentrasiegradiënteksperimente kan uitgevoer word om die beste kombinasie van onderlaag en sonde te vind.

Termiese fietsry protokol

Notas

1.Die amplifikasietempo van vinnige DNA-polimerase moet nie minder as 1 kb/10 s wees nie.Die temperatuurstyging en dalingtempo, temperatuurbeheermodus en hittegeleidingsdoeltreffendheid van verskillende PKR-instrumente verskil baie, daarom word dit aanbeveel om die optimale reaksietoestande vir die spesifieke vinnige PKR-instrument te optimaliseer.

2.Die stelsel is hoogs aanpasbaar, met hoër spesifisiteit en sensitiwiteit.

3.Geskik vir gebruik as hoë sensitiwiteit PCR opsporing reagense, en kan gebruik word in multipleks PCR amplifikasie reaksies.

4.5′→3′ polimerase aktiwiteit, 5′→3′ eksonuklease aktiwiteit;geen 3′→5′ eksonuklease-aktiwiteit;geen proefleesfunksie nie.

5.Geskik vir kwalitatiewe en kwantitatiewe toetsing van PCR en RT-PCR.

6.Die 3'-punt van die PCR-produk is A, wat direk in 'n T-vektor gekloneer kan word.

7.Die drie-stap metode word aanbeveel vir primers met lae uitgloeiingstemperature of vir amplifikasie van fragmente langer as 200 bp.