Multiplex qPCR Probe Premix
Kat nommer: HCB5051A
TaqMan multiplex qPCR Master Mix (Dye Based) is 'n voorafoplossing vir 2 × intydse kwantitatiewe PCR-versterking wat gekenmerk word deur hoë sensitiwiteit en spesifisiteit, wat blou van kleur is, en het die effek van monsterbyvoeging.Hierdie produk is 'n 2× Mix voorafgemengde reagens wat tot vier fluoresserende kwantitatiewe PCR-reaksies in 'n enkele reaksieput moontlik maak.Hierdie produk bevat die geneties gemodifiseerde teenliggaampiemetode om Taq-ensiem warm te begin, wat die amplifikasie-sensitiwiteit en spesifisiteit aansienlik verbeter.Terselfdertyd het hierdie produk die multi-reaksie buffer diep geoptimaliseer, wat die versterkingsdoeltreffendheid van die reaksie kan verbeter en die effektiewe versterking van lae-konsentrasie sjablone kan bevorder.Hierdie produk kan gebruik word vir genotipering en multipleks kwantitatiewe analise.
Spesifikasie
| Warm Begin | Ingeboude warm begin |
| Opsporingsmetode | Primer-sonde opsporing |
| PCR metode | qPCR |
| Polimerase | Taq DNA-polimerase |
| Tipe monster | DNA |
Bergingsvoorwaardes
Die produk word met droë ys gestuur en kan vir 2 jaar by -25~-15℃ gestoor word.
Instruksies
1. ReaksieStelsel
| Komponente | Volume (μL) | Finale konsentrasie |
| 2× TaqMan multiplex qPCR Master Mix | 12.5 | 1× |
| Onderlaagmengsel (10 μmol/L) a | × | 0,1 - 0,5 μmol/L |
| Sondemengsel (10 μmol/L)b | × | 50 - 250 nmol/L |
| Rox verwysingskleurstof | 0,5 | 1× |
| Sjabloon DNA/cDNA | 1-10 | - |
| ddH2O | tot 25 | - |
Notas:Meng deeglik voor gebruik om oormatige borrels as gevolg van sterk skud te vermy.
a.Onderlaagkonsentrasie: Onderlaagmengsel bevat veelvuldige pare onderlaag, gewoonlik elke onderlaag teen 'n finale konsentrasie van 0.2 μmol/L en kan ook aangepas word tussen 0.1 en 0.5 μmol/L soos toepaslik.
b.Probekonsentrasie: Probe Mix bevat veelvuldige probes met verskillende fluoressensie seine, en die konsentrasie van elke probe kan volgens spesifieke situasie tussen 50 en 250 nmol/L aangepas word.
1.Rox kleurstof verwysing: Dit word gebruik op Real Time PCR amplifikasie instrument soos Applied Biosystems om die fout van fluoressensie sein wat tussen putte gegenereer word reg te stel;hierdie produk bevat nie Rox-kleurstofverwysing nie.Cas#10200 word aanbeveel indien nodig.
2.Sjabloonverdunning: qPCR is hoogs sensitief, en dit word aanbeveel om die sjabloon vir gebruik te verdun.As die sjabloon 'n cDNA-voorraadoplossing is, moet die sjabloonvolume nie 1/10 van die totale volume oorskry nie.
3.Reaksiestelsel: 25μL, 30μL of 50 μL word aanbeveel om die doeltreffendheid en herhaalbaarheid van teikengeenamplifikasie te verseker.
4.Stelselvoorbereiding: Berei asseblief voor in die superskoon bankie, en gebruik die punte en reaksiebuise sonder nuklease-residu;dit word aanbeveel om die wenke met filterpatrone te gebruik.Vermy kruiskontaminasie en aërosolkontaminasie.
2.Reaksie program
| Fietsstap | Temp. | Tyd | Siklusse |
| Aanvanklike-denaturasie | 95 ℃ | 5 min | 1 |
| Denaturasie | 95 ℃ | 15 sek | 45 |
| Uitgloeiing/Verlenging | 60 ℃ | 30 sek |
Notas:
1.Uitgloeiing/Verlenging: Die temperatuur en tyd kan gepas aangepas word volgens die ontwerpte primer Tm-waarde.
2.Fluoresentasie sein verkryging: Die fluoressensie sein verkryging tyd wat benodig word vir verskillende qPCR opsporing instrumente is anders, stel asseblief volgens die minimum tyd limiet.Die tyd van verskeie algemene instrumente word soos volg ingestel:
20 sekondes: Toegepaste Biosystems 7700, 7900HT, 7500 Fast
31 sekondes: Toegepaste Biosystems 7300
32 sekondes: Toegepaste Biosystems 7500
Notas
Dra asseblief die nodige PPE, soos laboratoriumjas en handskoene, om jou gesondheid en veiligheid te verseker!
