BspQI
BspQI kan rekombinant uitgedruk word in E. coli wat spesifieke plekke kan herken en onder geproduseer word
BspQI, 'n IIs beperking endonuklease beperking endonuklease, is afgelei van 'n rekombinante E. coli stam wat die gekloonde en gemodifiseerde BspQI gen van Bacillus sphaericus dra.Dit kan spesifieke plekke herken, en herkenningsvolgorde en splitsingsplekke is soos volg:
5' · · · · GCTCTTC(N) · · · · · · · · · · · · 3'
3' · · · · CGAGAAG(NNNN) · · · · 5'
Produk Funksies
1. Hoë aktiwiteit, Vinnige vertering;
2. Lae steraktiwiteit, wat akkurate sny soos "skalpel" verseker;
3. Sonder BSA en vry van dierlike oorsprong;
Metielasie sensitiwiteit
Dam metilering:Nie Sensitief nie;
Dcm metilering:Nie Sensitief nie;
CpG-metilering:Nie Sensitief nie;
Bergingstoestande
Die produk moet versend word ≤ 0℃;Berg by -25~- 15℃ toestand.
Berging buffer
20 mM Tris-HCl, 0.1 mM EDTA, 500 mM KCl, 1.0 mM ditiotreïtol, 500 µg/ml Rekombinante Albumien, 0. 1% Trition X-100 en 50% gliserol (pH 7.0 @ 25°C).
Eenheid Definisie
Een eenheid word gedefinieer as die hoeveelheid ensiem wat benodig word om 1 µg Interne beheer DNA in 1 uur by 50°C in 'n totale reaksievolume van 50 µL te verteer.
Kwaliteitsbeheer
Proteïensuiwerheidstoets (SDS-PAGE):Die suiwerheid van BspQI was ≥95% bepaal deur SDS-PAGE analise.
RNase:10U BspQI met 1.6μg MS2 RNA vir 4 uur by 50℃ lewer geen afbraak soos bepaal deur agarosegelelektroforese nie.
Nie-spesifieke DNase-aktiwiteit:10U BspQI met 1μg λ DNA by 50 ℃ vir 16 uur, in vergelyking met 50 ℃ vir 1 uur, lewer geen oortollige DNA soos bepaal deur agarosegelelektroforese nie.
Ligasie en hersny:Na vertering van 1 μg λDNA met 10U BspQI, kan DNA-fragmente met T4 DNA-ligase by 16ºC geligeer word.En hierdie geligeerde fragmente kan herbesny word met BspQI.
E coli DNA: E. coli 16s rDNA-spesifieke TaqMan qPCR-opsporing het getoon dat E.coli genoomresidu ≤ 0.1pg/ul.
Gasheerproteïenresidu:≤ 50 dpm
Bakteries Endotoksien: LAL-toets, volgens Chinese Pharmacopoeia IV 2020-uitgawe, gellimiettoetsmetode, algemene reël (1143).Bakteriële endotoksieninhoud moet ≤10 EU/mg wees.
Reaksiestelsel en toestande
| Komponent | Volume |
| BspQ I(10 U/μL) | 1 μL |
| DNA | 1 μg |
| 10 x BspQ I-buffer | 5 μL |
| dd H2O | Tot 50 μL |
Reaksietoestande: 50 ℃, 1~16 uur.
Hitte-inaktivering: 80°C vir 20 min.
Die aanbevole reaksiestelsel en toestande kan relatief goeie ensiemverteringseffek verskaf, wat slegs vir verwysing is, verwys asseblief na die eksperimentele resultate vir besonderhede.
Produk toepassing
Beperking endonuklease vertering, Vinnige kloning.
Notas
1. Die volume ensiem ≤ 1/10 van die reaksievolume.
2. Steraktiwiteit kan voorkom wanneer gliserolkonsentrasie meer as 5% is.
3. Splitsingsaktiwiteit kan voorkom wanneer Substraat onder die aanbevole verhouding is.
