Alkaliese fosfatase (ALP)
Beskrywing
Alkaliese fosfatase is afkomstig van 'n rekombinante E. coli-stam wat die TAB5-geen dra.Die ensiem kataliseer die defosforilering van 5´- en 3´-ente van DNA- en RNA-fosfomonoesters.Dit hidroliseer ook ribose, sowel as deoksiribonukleosiedtrifosfate (NTP's en dNTP's).TAB5 Alkaliese fosfatase werk op 5' uitstaande, 5' ingeboude en stomp punte.Die fosfatase kan in baie molekulêre biologie toepassings gebruik word, soos kloning of sonde-eindetikettering om die gefosforileerde punte van DNA of RNA te verwyder.In kloningseksperimente verhoed defosforilering die gelineariseerde plasmied-DNS van selfligasie.Dit kan ook nie-geïnkorporeerde dNTP's in PCR-reaksies afbreek om 'n sjabloon vir DNA-volgordebepaling voor te berei.Die ensiem word heeltemal en onomkeerbaar geïnaktiveer deur vir 5 minute by 70°C te verhit, wat die verwydering van die fosfatase voor afbinding of eindetikettering onnodig maak.
Chemiese struktuur
Spesifikasie
Toets items | Spesifikasies |
Ensiemaktiwiteit | 5U/μL |
Reinheid | ≥ 95% |
Endonuklease aktiwiteit | Nie opspoorbaar nie |
Eksonuklease-aktiwiteit | Nie opspoorbaar nie |
Nicking-aktiwiteit | Nie opspoorbaar nie |
RNase-aktiwiteit | Nie opspoorbaar nie |
E.coli DNA | ≤1 kopie/5U |
Endotoksien | LAL-toets, ≤ 10EU/mg |
Vervoer en berging
Vervoer:Yspakkies
Berging:Berg by -25~-15°C (vermy herhaalde vries en ontdooiing)
Aanbevole hertoets Lewe:2 jaar