2×PCR Super Mix (met kleurstof)
2× PCR Master Mix bevat Taq DNA Polimerase, dNTP's en ander PCR-vereiste komponente.Die Master Mix is stabiel vir 3 maande by 4 ℃ met ons pasgemaakte stabiliseerders.Die voorafmengseloplossing is geoptimaliseer vir konvensionele PCR en gereed om te gebruik deur DNA-sjabloon en primers by te voeg.Die PCR produkte kan direk gelaai word vir elektroforese met vooraf gelaaide broomfenol blou kleurstof.Die geamplifiseerde produkte bevat 3'-dA-uitsteeksel en kan maklik in T-vektor gekloneer word.Die 2×PCR Master Mix vereenvoudig PCR-prosedure en verminder kontaminasie.
Bergingsvoorwaardes
Produkte moet vir 2 jaar by -25℃~-15℃ gestoor word.
Spesifikasies
Getrouheid (teenoor Taq) | 1× |
Warm Begin | No |
Oorhang | 3 '-A |
Polimerase | Taq DNA Polimerase |
Reaksie-formaat | SuperMix of Master Mix |
Reaksiespoed | Standaard |
Produk Tipe | PCR Master Mix (2x) |
Instruksies
1.Reaksiestelsel
Komponente | Volume(μL) |
Sjabloon DNA | Geskik |
Onderlaag 1 (10 μmol/L) | 2 |
Onderlaag 2 (10 μmol/L) | 2 |
2× PCR Master Mix | 25 |
ddH2O | tot 50 |
2.Amplifikasieprotokol
Fiets stappe | Temperatuur (°C) | Tyd | Siklusse |
Aanvanklike denaturasie | 94 | 5 min | 1 |
Denaturasie | 94 | 30 sek | 35 |
Uitgloeiing | 50-60 | 30 sek | |
Uitbreiding | 72 | 30-60 sek/kb | |
Finale uitbreiding | 72 | 10 min | 1 |
Let wel:
1) Sjabloongebruik: 50-200ng genomiese DNA;0.1-10ng plasmied DNA.
2) Mg2+konsentrasie: Hierdie produk bevat 3mM MgCl2, geskik vir die meeste PCR-reaksies.
3) Uitgloeiingstemperatuur: Verwys asseblief na die teoretiese Tm-waarde van primers.Die uitgloeitemperatuur kan op 2-5℃ laer gestel word as die teoretiese waarde van die onderlaag.
4) Uitbreidingstyd: Vir molekulêre identifikasie word 30 sek/kb aanbeveel.Vir geenkloning word 60 sek/kb aanbeveel.
Notas
1.PCR-produkte met 2× PCR Master Mix is nie geskik vir poliakrielamiedgelelektroforese nie.
2.Vir jou veiligheid en gesondheid, dra asseblief laboratoriumjasse en weggooibare handskoene vir operasie.
3.Dit word SLEGS vir navorsingsgebruik gebruik!