Ultra Nuclease GMP-graad
Kat nommer: HC2016A
UltraNuclease GMP-graad word uitgedruk en gesuiwer in Escherichia coli (E.coli) deur geneties gemanipuleer en voorberei onder die GMP-omgewings.Dit kan die viskositeit van sel supernatant en sellysaat in wetenskaplike navorsing verminder, proteïen suiwering doeltreffendheid verhoog en proteïen funksionele navorsing verbeter.Die produk kan ook gasheer-nukleïensuurreste tot pg-graad verminder, wat die werkverrigting en veiligheid van biologiese produkte van toepassings verbeter, insluitend virussuiwering, entstofvervaardiging en proteïen/polisakkaried farmaseutiese vervaardiging.Boonop kan die produk ook aangewend word om die klont van menslike perifere bloed mononukleêre selle (PBMC) in selterapie en entstofontwikkeling te voorkom.
UltraNuclease word voorsien in die vorm van 'n gesteriliseerde reagens, geëlueer in buffer (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% gliserien), met die voorkoms van 'n kleurlose, deursigtige vloeistof.Hierdie produk word volgens GMP-prosesvereistes vervaardig en in 'n vloeibare vorm voorsien.
Komponente
UltraNuclease GMP-graad (250 U/μL)
Bergingsvoorwaardes
Die produk word met droë ys gestuur en kan vir twee jaar by -25℃~-15°C gestoor word.
As die produk oopgemaak is en langer as 'n week by 4℃ gestoor is, beveel ons aan om te filterdie produk om mikrobiese kontaminasie te voorkom.
Spesifikasies
| Uitdrukking Gasheer | Rekombinante E. coli met UltraNuclease geen |
| Molekulêre gewig | 26,5 kDa |
| soelektriese punt | 6,85 |
| Reinheid | ≥99% (SDS-BLADSY) |
| Bergingsbuffer | 20 mM Tris-HCl pH 8.0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% gliserien |
|
Eenheid Definisie | Die definisie van een aktiwiteitseenheid (U) is die hoeveelheid ensiem wat gebruik word omverander die absorpsiewaarde van ΔA260 met 1,0 in 30 minute in 'n 2,625 mlreaksiestelsel by 37℃ met 'n pH van 8.0 (gelykstaande aan volledige vertering van37 μg salm sperm DNA in oligonukleotiede). |
Instruksies
1. Voorbeeld Versameling
Aaneenlopende selle: verwyder die medium, was die selle met PBS, en verwyder die supernatant.
Suspensieselle: versamel die selle deur sentrifugering, was die selle met PBS, sentrifugeer by 6 000rpm vir 10 min, versamel die korrel.
Escherichia coli: versamel die bakterieë deur sentrifugering, was een keer met PBS, sentrifugeer by 8 000rpm vir 5 min, en versamel die korrel.
2. Monster Behandeling
Behandel die versamelde selkorrels met lisebuffer teen die verhouding van massa(g) tot volume(ml)1:(10-20), of deur meganiese of chemiese metodes op ys of by kamertemperatuur (1g selkorrel bevat ongeveer
109 selle).
3. Ensiembehandeling
Voeg 1-5mM MgCl by die reaksiestelsel en pas die pH aan na 8-9.
Voeg UltraNuclease volgens die verhouding van 250 eenhede by om 1 g selkorrels te verteer, inkubeer by 37℃ vir meer as 30 minute.Verwys asseblief na die "Aanbevole reaksietyd"-vorm om die te kiesduur van die behandeling.
4. Supernatant Versameling
Sentrifugeer teen 12 000 rpm vir 30 minute en versamel die supernatant.
Let wel: As die oplossing suur of alkalies is, of hoë konsentrasies sout, skoonmaakmiddels, ofdenaturante, verhoog asseblief die ensiemdosis of verleng die behandelingstyd dienooreenkomstig.
Aanbevole reaksie voorwaardesons
| Parameter | Optimale Toestand | Effektiewe toestand |
| Mg²+Konsentrasie | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Temperatuur | 37℃ | 0-42℃ |
| DTT konsentrasie | 0-100 mM | >0 mM |
| Mercaptoethanol Konsentrasie | 0-100 mM | >0 mM |
| Monovalente katioonkonsentrasie | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Fosfaat lon Konsentrasie | 0-10 mM | 0-100 mM |
Aanbeveel Reaksie Tyd (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| UltraNuklease hoeveelheid (eindkonsentrasie) | Reaksie Tyd |
| 0,25 U/ml | > 10 uur |
| 2,5 U/ml | > 4h |
| 25 U/ml | 30 min |
Notas:
Dra asseblief die nodige PPE, soos laboratoriumjas en handskoene, om jou gesondheid en veiligheid te verseker!
