Peroksidase (mierikswortel bron) Sinoniem: Waterstofperoksied oksidoreduktase;HRP
Beskrywing
Peperwortelperoksidase (HRP) word uit die wortels van peperwortel (Amoracia rusticana) geïsoleer en behoort aan die ferroprotoporfiriengroep van peroksidases.HRP kombineer maklik met waterstofperoksied (H2O2).Die resulterende [HRP-H2O2]-kompleks kan 'n wye verskeidenheid waterstofskenkers oksideer:
Skenker + H2O2 → Geoksideerde skenker + 2 H2O
HRP sal verskeie substrate oksideer (sien Tabel 1):
• Chromogenies
• Chemiluminescent (soos luminol of isoluminol)
• Fluorogeen (soos tyramien, homovanilliensuur of 4-hidroksifenielasynsuur)
HRP is 'n enkelketting polipeptied wat vier disulfiedbrûe bevat.HRP is 'n glikoproteïen wat 18% koolhidrate bevat.Die koolhidraatsamestelling bestaan uit galaktose, arabinose, xilose, fukose, mannose, mannosamien en galaktosamien, afhangende van die spesifieke isosiem.
HRP is 'n wyd gebruikte etiket vir immunoglobuliene in baie verskillende immunochemie-toepassings, insluitend immunoblotting, immunohistochemie en ELISA.HRP kan aan teenliggaampies gekonjugeer word deur verskeie verskillende metodes, insluitend glutaaraldehied, perjodaat oksidasie, deur disulfiedbindings, en ook via amino- en tiolgerigte kruisbinders.HRP is die mees gewenste etiket vir teenliggaampies, aangesien dit die kleinste en mees stabiele van die drie gewildste ensiemetikette is (peroksidase, β-galaktosidase, alkaliese fosfatase) en die glikosilering daarvan lei tot laer nie-spesifieke binding.'n Oorsig van glutaaraldehied- en periodaat-vervoegingsmetodes is gepubliseer.
Peroksidase word ook gebruik vir die bepaling van glukose4 en peroksiede in oplossing.Verskeie publikasies, 6-24 proefskrifte, 25-29 en proefskrifte 30-46 het die gebruik van P8375 in hul navorsingsprotokolle aangehaal.
Chemiese struktuur
Spesifikasie
Toets items | Spesifikasies |
Beskrywing | Rooibruin amorfe poeier, gelyofiliseer |
Aktiwiteit | ≥100E/mg |
Suiwerheid (SDS-BLADSY) | ≥90% |
Oplosbaarheid (10mg poeier/ml) | Duidelik |
Besoedelende ensieme | |
NADH/NADPH oksidase | ≤0,1% |
Katalase | ≤0,005% |
ATPase | ≤0,03% |
Vervoer en berging
Vervoer:Versend onder 2-8°C
Berging:Berg by -20°C (langtermyn), 2-8°C (korttermyn)
Hertoets word aanbeveelLewe:2 jaar