One Step Fast RT-qPCR Probe Premix-UNG
Kat nommer: HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit (VIR FAST) is 'n probe-gebaseerde RT-qPCR vinnige opsporingstel wat geskik is vir enkelpleks of multipleks kwantitatiewe PCR deur RNA as 'n sjabloon te gebruik (soos RNA virus).Hierdie produk gebruik 'n nuwe generasie teenliggaam-gemodifiseerde Taq DNA Polimerase en een-stap toegewyde Reverse Transcriptase, met 'n geoptimaliseerde buffer vir vinnige amplifikasie, wat vinniger amplifikasiespoed, hoër amplifikasie doeltreffendheid en spesifisiteit het.Dit ondersteun gebalanseerde versterking in beide enkelpleks en multipleks van lae en hoë konsentrasie monsters in 'n kort tyd.
Komponente
1. 5×RT-qPCR buffer (U+)
2. Ensiemmengsel (U+)
Notas:
a.5×RT-qPCR buffer (U+) sluit dNTP en Mg in2+;
b.Ensiemmengsel (U+) sluit in omgekeerde transkriptase, Hot Start Taq DNA-polimerase, RNase-inhibeerder en UDG;
c.Gebruik RNase-vrye wenke, EP-buise, ens.
Voor gebruik, meng die 5×RT-qPCR buffer (U+) deeglik.As daar enige neerslag is na ontdooiing, wag vir die buffer om terug te keer na kamertemperatuur, meng en los op, en gebruik dit dan normaal.
Bergingsvoorwaardes
Die produk word met droë ys gestuur en kan vir 1 jaar by -25~-15℃ gestoor word.
Instruksies
1. Reaksie Stelsel
| Komponente | Volume (20 μL reaksie) |
| 2 × RT-qPCR buffer | 4μL |
| Ensiemmengsel (U+) | 0,8 μL |
| Primer Voorwaarts | 0,1~ 1,0μM |
| Primer Omgekeerde | 0,1~ 1,0μM |
| TaqMan-ondersoek | 0.05~0.25μM |
| Sjabloon | X μL |
| RNase-vrye water | tot 25μL |
Notas: Reaksievolume is 10-50μL.
2. Fietsryprotokol (Standard)
| Siklus stap | Temp. | Tyd | Siklusse |
| Omgekeerde transkripsie | 55 ℃ | 10 min | 1 |
| Aanvanklike denaturasie | 95 ℃ | 30 sek | 1 |
| Denaturasie | 95 ℃ | 10 sek | 45 |
| Uitgloeiing/Verlenging | 60 ℃ | 30 sek |
| Fietsry protokol (vinnig) Siklus stap |
Temp. |
Tyd |
Siklusse |
| Omgekeerde transkripsie | 55 ℃ | 5 min | 1 |
| Aanvanklike denaturasie | 95 ℃ | 5 s | 1 |
| Denaturasie | 95 ℃ | 3 s | 43 |
| Uitgloeiing/Verlenging | 60 ℃ | 10 s |
Notas:
a.Omgekeerde transkripsie temperatuur is tussen 50 ℃ tot 60 ℃, die verhoging van die temperatuur help om komplekse strukture en hoë CG inhoud sjablone te versterk;
b.Die optimale uitgloeiingstemperatuur moet aangepas word op grond van die Tm-waarde van die onderlaag, en kies die kortste tyd vir fluoressensieseinversameling gebaseer op die Real Time PCR-instrument.
Notas
Dra asseblief die nodige PPE, soos laboratoriumjas en handskoene, om jou gesondheid en veiligheid te verseker!
