Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Beskrywing
Kat nommer: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix is 'n multipleks kwantitatiewe PCR Kit gebaseer op RNA as sjabloon.In die eksperiment word omgekeerde transkripsie en kwantitatiewe PKR in dieselfde reaksiebuis uitgevoer, wat die eksperimentele operasie vereenvoudig en die risiko van kontaminasie verminder.Die unieke ontwerp van buffer- en ensiemmengsel kan in een-stap gelyofiliseerde stelsel gebruik word.Die kit maak gebruik van hittebestande omgekeerde transkripsie vir doeltreffende sintese van eerste string cDNA deur gebruik te maak van hotstart Taq DNA Polimerase vir kwantitatiewe amplifikasie.Dit bevat geoptimaliseerde reaksiebuffer, ensiememengsels, ens., en faktore wat nie-spesifieke PCR-amplifikasie effektief inhibeer en die amplifikasie-doeltreffendheid van veelvuldige qPCR-reaksies verbeter, is bygevoeg, wat meervoudige fluoressensie-kwantitatiewe amplifikasie moontlik maak terwyl die amplifikasie-doeltreffendheid van primers verseker word.
Komponente
Naam |
1. Lyo-buffer |
2. Lyo-Ensiemmengsel |
3. Lyo-beskermer |
Vervoer toestandioon
A: Lyo-buffer en beskermer: -25 ~ -15 ℃, raklewe is 1 jaar.
B: Lyo-ensiemmengsel, 2-8 ℃, raklewe is 6 maande.
Instruksie vir werking
1. Reaksiestelsel (Neem 25μL as voorbeeld)
Komponente | Volume (μL) | Finale konsentrasie |
Lyo-buffer | 6 | 1* |
Lyo-ensiemmengsel | 1 | - |
Lyo-beskermer | 8 | - |
Onderlaagmengsel (10μM) | 1 | 0,1- 1uM |
Sondemengsel (10μM) | 0,5 | 0,05-0,5 uM |
RNA-sjabloon | 5 | - |
DEPC H2O | Tot 25 | - |
2. Geoptimaliseerde fietsryprotokol
1) Standaardfietsryprotokol
Reaksie stadium | Temperatuur | Tyd | Siklus | |
1 | Omgekeerde transkripsie | 50°Ca | 10min | 1 |
2 | Aanvanklike denaturasie | 95°C | 5min | 1 |
3 | Amplifikasie reaksie | 95°C | 15 sek | 45 siklusse |
60°Cb | 30 sekc |
2) Vinnige fietsry-protokol
| Reaksie stadium | Temperatuur | Tyd | Siklus |
1 | Omgekeerde transkripsie | 50°Ca | 2min | 1 |
2 | Aanvanklike denaturasie | 95°C | 2 sek | 1 |
3 | Amplifikasie reaksie | 95°C | 1 sek |
45 siklusse |
60°Cb | 13 sekc |
Let wel:
a) Omgekeerde transkripsie: Die temperatuur kan 42°C of 50°C vir 10-15 minute kies.
b) Amplifikasie reaksie: Die temperatuur word aangepas volgens die Tm-waarde van die ontwerpte primers.
c)Fluoresensie sein verkryging: Stel asseblief die eksperimentele prosedure in volgens die vereistes van dieinstrument handleiding.
Tegniese inligting/spesifikasies
Warm Begin | Ingeboude warm begin |
Opsporingsmetode | Primer-sonde opsporing |
PCR metode | Een stap RT-qPCR |
Tipe monster | RNA |
Notas
1. Hierdie produk is slegs vir navorsingsgebruik.
2. Dra asseblief die nodige PPE, soos laboratoriumjas en handskoene, om jou gesondheid en veiligheid te verseker!