CHO HCP ELISA Kit

'n Eenstap-immunosorberende ELISA-metode word in hierdie toets gebruik.Monsters wat CHOK1 HCP bevat reageer gelyktydig met HRP-gemerkte bok-anti-CHOK1-teenliggaampies en anti-CHOK1-teenliggaampies wat op die ELISA-plaat bedek is, en vorm uiteindelik 'n toebroodjiekompleks van vastefase-teenliggaampies-HCP-gemerkte teenliggaampies.Ongebonden antigeen-teenliggaampies kan verwyder word deur die ELISA-plaat te was.Die TMB-substraat word by die put gevoeg vir voldoende reaksie.Die kleurontwikkeling word gestop nadat die stopoplossing bygevoeg is, en die OD of absorpsiewaarde van die reaksieoplossing by 450/650nm word met 'n mikroplaatleser gelees.Die OD-waarde of absorpsiewaarde is eweredig aan die HCP-inhoud in die oplossing.Hieruit kan die HCP-konsentrasie in die oplossing volgens die standaardkurwe bereken word.

Toepassing

Hierdie stel word gebruik om die inhoud van CHOK1-gasheerselproteïenresidue in monsters kwantitatief op te spoor.

Componente

Toerusting benodig

Berging en stabiliteit

1.Vervoer teen -25~-15°C.

2.Bergingstoestande is soos getoon in Tabel 1;komponente 1-2 word gestoor ≤–20°C,5-6 word RT gestoor,3、4、7、8 word by 2-8℃ gestoor;die geldigheidstydperk is 12 maande.

Produk parameters

1.Sensitiwiteit: 1 ng/ml

2.Bespeuringsreeks: 3-100 ng/ml

3.Presisie: Intra-toets CV≤ 10%, inter-toets CV≤ 15%

4.HCP-dekking: >80%

5.Spesifisiteit: Hierdie stel is universeel aangesien dit spesifiek met CHOK1 HCP reageer, onafhanklik van die suiweringsproses.

Reagens voorbereiding

1.PBST 0,05%

Neem 15 ml 20×PBST 0,05%, verdun in ddH₂O, en gemaak tot 300 ml.

2.1,0% BSA

Neem 1g BSA uit die bottel en verdun in 100 ml PBST 0.05%, meng goed tot heeltemal opgelos, en stoor by 2-8°C.Die voorbereide verdunningsbuffer is geldig vir 7 dae.Dit word aanbeveel om voor te berei soos nodig.

3.Opsporingsoplossing 2μg/ml

Neem 48μL 0.5 mg/ml Anti-CHO HCP-HRP en verdun in 11,952μL 1% BSA om 'n finale konsentrasie van 2μg/ml opsporingsoplossing te verkry.

4.QC en voorbereiding van CHOK1 HCP-standaarde

Tabel: Voorbereiding van QC en Standaarde 

Assay prosedure

1.Berei die reagense voor soos aangedui in "Reagensvoorbereiding" hierbo.

2.Neem 50μL standaarde, monsters en QC's (verwys na Tabel 3) in elke put, voeg dan 100μL Detection-oplossing (2μg/mL) by;Bedek plaat met verseëlaar, en plaas die ELISA-plaat op die termomenger.Inkubeer by 500rpm, 25±3℃ vir 2 uur.

3.Keer die mikroplaat in die wasbak om en gooi die deklaagoplossing weg.Pipetteer 300μL PBST 0.05% in elke put om die ELISA-plaat te was en die oplossing weg te gooi, en herhaal die wasgoed 3 keer.Keer die bord om op 'n skoon papierhanddoek en klop droog.

4.Voeg 100μL TMB-substraat (sien Tabel 1) by elke put, verseël die ELISA-plaat en inkubeer in die donker by 25±3℃ vir 15 min.

5.Pipetteer 100μL stopoplossing in elke put.

6.Meet absorpsie by golflengte van 450/650nm met mikroplaatleser.

7.Ontleed data deur SoftMax of ekwivalente sagteware.Stip standaardkromme deur 'n vier-parameter logistiese regressiemodel te gebruik.

Standaard Curve Voorbeeld

LET WEL: Indien die konsentrasie HCP in die monster die boonste limiet van die standaardkurwe oorskry, moet dit behoorlik verdun word met verdunningsbuffer voor toetsing.

NOTAS

Die stopoplossing is 2M swaelsuur, hanteer asseblief versigtig om spatsels te voorkom!